植物胚胎發生是從單細胞合子建立完整體軸和組織系統的過程。擬南芥(Arabidopsis thaliana)因其高度規則的細胞分裂模式和豐富的突變體庫,成為研究植物胚發育的首選模型。
合子極性與第一次分裂
合子的第一次分裂將頂端(apical)和基端(basal)命運分開。此不對稱分裂受 auxin 極性分布驅動:受精前,卵細胞中 YDA(YODA,MAPKKK)通路處於低活性→維持靜止;受精後,精子帶入的 SSP(SHORT SUSPENSOR, RLCK 激酶)活化 YDA→YDA 通路在基端細胞中高活性→指定懸垂器命運(Bayer et al., 2009, Science)。YDA 敲除導致懸垂器缺失和胚軸異常。
PIN7 在合子和早期胚中的極性分布將 auxin 向頂端運輸,建立頂端 auxin maximum 後 PIN1 在球形期反轉方向將 auxin 向基端運輸——這個「PIN 反轉」是根端原基建立的觸發事件(Friml et al., 2003, Nature)。
分子軸性建立
頂-基軸建立後,軸性的維持和精煉依賴轉錄因子的互相抑制:
(1)頂端:HD-ZIP III 家族(PHB/PHV/REV)標記頂端/向軸命運。miR165/166 從基端/遠軸側限制 HD-ZIP III 的表達範圍(Emery et al., 2003, Curr Biol)。
(2)基端/根:PLETHORA(PLT1/PLT2)AP2 家族轉錄因子由 auxin maximum 通過 ARF 通路誘導,構成根幹細胞微環境的主要轉錄調控子(Aida et al., 2004, Cell)。PLT 蛋白的梯度(高→低 = 幹細胞→分裂→分化)與 auxin 梯度共線性,提供根的「位置資訊」。
(3)徑向軸:球形期起 ATML1/PDF2(L1-specific HD-ZIP IV)限制在原表皮→指定表皮身份;SHR 從前維管束中柱向外移動一層→被 SCR 扣留→指定內皮層。此徑向分化在胚 globular stage 就已建立。
子葉對稱性與 CUC 邊界基因
雙子葉植物胚在心形期建立雙側對稱。CUC1/CUC2(CUP-SHAPED COTYLEDON,NAC 家族轉錄因子)在子葉邊界表達,被 miR164 調控(Laufs et al., 2004, Development)。CUC 活化 STM(SHOOT MERISTEMLESS)在子葉之間維持 SAM 的未分化狀態。cuc1 cuc2 雙突變→子葉融合為杯狀→SAM 缺失。auxin 向子葉原基的匯聚(PIN1 極性驅動)與 CUC 的邊界限制互相配合建立正確的雙側對稱。
胚成熟與休眠的表觀遺傳調控
胚成熟期,LEC1(LEAFY COTYLEDON 1, HAP3/NF-YB 家族)和 LEC2(B3 域轉錄因子)活化種子儲存蛋白(SSP)基因和 ABA 合成基因。成熟後,VAL1/VAL2(B3 抑制子)招募 PRC2 沉積 H3K27me3 於 LEC1/LEC2/FUS3 基因座,建立「種子→營養生長」的表觀遺傳開關(Suzuki & McCarty, 2008, Plant Physiol)。缺乏此沉默機制的突變體(如 pkl)在營養生長階段仍異位表達胚成熟基因→產生體細胞胚(somatic embryo)。
體細胞胚發生與再生
在適當的 auxin 處理下,擬南芥的體細胞可活化胚發育程式。BABY BOOM(BBM, AP2/ERF 家族)和 WUSCHEL 是體細胞胚發生的關鍵啟動因子——BBM 過表達可不需外源荷爾蒙就誘導體細胞胚(Boutilier et al., 2002, Plant Cell)。BBM 直接活化 LEC1/LEC2,重啟胚成熟程式。這項知識在農業上用於基因型難再生作物(如穀類)的遺傳轉殖(Lowe et al., 2016, Plant Cell)。
