組織病理學的分子技術整合、數位病理與精準醫學時代的角色。
免疫組織化學（IHC）的技術原理
IHC 利用抗體-抗原特異性結合偵測組織中蛋白質。Direct method：一級抗體直接帶標記（快但靈敏度低）。Indirect method（最常用）：一級抗體結合目標→二級抗體（帶 biotin 或 polymer）→avidin/streptavidin-HRP 或 polymer-HRP→DAB chromogen（棕色沉積）。重要的 IHC panel：
- CK7⁺/CK20⁻ → 肺、乳房、卵巢、胰膽
- CK7⁻/CK20⁺ → 大腸直腸
- CK7⁺/CK20⁺ → 膀胱移行上皮
- TTF-1 → 肺腺癌、甲狀腺
- CDX2 → 大腸腺癌
- ER/PR/HER2 → 乳癌分子分型的基礎
分子病理學技術
(1) In situ hybridization（ISH）：FISH（fluorescence ISH）偵測基因擴增（HER2 FISH）、易位（BCR-ABL, ALK rearrangement）、缺失。CISH/SISH 為明視野替代方案。
(2) PCR-based assays：RT-PCR 偵測特定突變（EGFR mutation、BRAF V600E）。MSI-PCR 偵測微衛星不穩定性（Lynch syndrome 篩檢和免疫治療標記）。
(3) Next-generation sequencing（NGS）：tumor profiling panels（Foundation One, MSK-IMPACT）同時偵測數百個基因的突變、CNV、fusion→精準用藥決策。TMB（tumor mutational burden）和 MSI status 預測免疫治療反應。
(4) Liquid biopsy：cfDNA（circulating tumor DNA）→非侵入性偵測腫瘤突變和監測治療反應。
數位病理學（Digital Pathology）
Whole slide imaging（WSI）：高解析度掃描整張切片→數位存檔和遠端會診。AI/Deep learning 應用：(1) 腫瘤偵測和分類（FDA 核准的 Paige Prostate 用於前列腺癌偵測）(2) 自動化 biomarker 評估（Ki-67 自動計數、PD-L1 scoring）(3) 從 H&E 形態預測分子特徵（如直接從 H&E 預測 MSI status、BRAF mutation，準確度 ~AUC 0.85-0.90）。限制：training data bias、病理科 workflow integration、法規和責任問題。
乳癌分子分型的病理決策
IHC-based surrogate：Luminal A（ER⁺/PR⁺/HER2⁻/Ki-67 low）→內分泌治療為主。Luminal B（ER⁺/PR±/HER2⁻/Ki-67 high 或 ER⁺/HER2⁺）→內分泌+化療±anti-HER2。HER2-enriched（ER⁻/PR⁻/HER2⁺）→anti-HER2+化療。Triple-negative（ER⁻/PR⁻/HER2⁻）→化療±免疫治療（PD-L1⁺）。Oncotype DX（21-gene RT-PCR assay）在 ER⁺/HER2⁻ 早期乳癌中預測化療獲益（TAILORx trial：Recurrence Score ≤25→可免化療）。
文獻參考：Coudray, N. et al. (2018). Nat Med, 24, 1559-1567 (DL lung cancer classification). / Sparano, J.A. et al. (2018). NEJM, 379, 111-121 (TAILORx).